论文标题：Probenecid Inhibits Human Metapneumovirus (HMPV) Replication In Vitro and in BALB/c Mice

论文链接：https://www.mdpi.com/1999-4915/16/7/1087

期刊名：Viruses

期刊主页：https://www.mdpi.com/journal/viruses

研究背景

人偏肺病毒（Human Metapneumovirus, HMPV）是一种单股负链RNA病毒，属于肺炎病毒科（Pneumoviridae），主要引起儿童、老年人及免疫缺陷人群的急性呼吸道感染，可导致肺炎和细支气管炎。在全球，该病毒每年造成逾1400万例儿童下呼吸道感染及数万例死亡。其临床症状与呼吸道合胞病毒（RSV）和季节性冠状病毒（CoV）类似，尽管其造成的疾病负担显著，目前尚无针对HMPV的特效抗病毒药物或疫苗。丙磺舒（Probenecid）是一种已获美国FDA批准的、具有超60年安全用药史的痛风治疗药物。近年来研究发现，其对流感病毒、RSV和SARS-CoV-2等多种呼吸道病毒具有广谱抗病毒活性，不论是在预防性（病毒感染前）还是治疗性（病毒感染后）给药，均表现出强效抗病毒活性。本研究首次评估了丙磺舒在体外和小鼠模型中抑制HMPV复制和治疗的效果，为老药新用提供了重要依据。

研究内容

研究发现丙磺舒在体外可以强效抑制HMPV复制。在LLC-MK2细胞（猕猴肾细胞系，为HMPV易感模型）中分别进行预防性给药（感染前24小时）和治疗性给药（感染后1小时），结果表明预防性给药时，≥0.5 μM的丙磺舒可以显著降低病毒复制（p < 0.0001），当丙磺舒浓度≥1.0 μM时，病毒载量降至检测限以下；治疗性给药时≥0.5 μM同样显著抑制病毒（p < 0.01）。该结果与丙磺舒抑制RSV、流感病毒的数据一致，证实了其对副黏病毒科的广谱抑制能力。

同时通过小鼠动物模型研究发现，丙磺舒在体内可以显著降低肺部病毒载量。在BALB/c小鼠（HMPV半许可模型）感染病毒前（预防）或感染后（治疗）24小时内，经口服给予丙磺舒，与PBS处理的对照组比较发现，丙磺舒治疗显著降低了小鼠的肺部病毒滴度（p < 0.0001）。其中，2 mg/kg剂量组的肺部病毒载量降低约2 log（99%）；200 mg/kg剂量组降低约4 log（99.99%）。该结果支持使用丙磺舒作为体内HMPV的潜在预防或治疗方法。

图1 丙磺舒可降低小鼠HMPV复制

在HMPV感染的第5天收集支气管肺泡灌洗液（BALF），进行细胞因子和趋化因子分析。发现HMPV感染仅显著上调BALF中的IP-10（CXCL10）水平（p < 0.05），其他24种细胞因子/趋化因子无显著变化。其中，2 mg/kg剂量的丙磺舒可降低IP-10水平，但200 mg/kg剂量组效果不显著，表明其免疫调节作用具有一定剂量依赖性。

图2 HMPV感染期间的细胞因子和趋化因子反应

丙磺舒的广谱抗病毒特性已在RSV、流感病毒和SARS-CoV-2等多种呼吸道病毒中得到验证。本研究的结果进一步支持了使用丙磺舒作为有效针对HMPV的广谱抗病毒药物，扩大了对丙磺舒治疗敏感的病毒谱，且其安全性已通过长期临床使用验证。作者团队近期发现，丙磺舒可抑制病毒复制所必需的JNK、ERK及其下游c-Jun的磷酸化，因此可能是一种广泛的抗病毒机制。未来可以进一步对低传代HMPV临床分离株展开研究。丙磺舒在体外和小鼠模型中均可以强效抑制HMPV复制。其已获批的安全性、广谱抗病毒活性及抗炎特性，支持其作为HMPV防治的临床转化候选药物。

作者介绍

佐治亚大学传染病学系Ralph A. Tripp教授为本文通讯作者。佐治亚大学Harrison C. Bergeron和Jackelyn Crabtree为本文的共同第一作者。佐治亚大学Tamas Nagy和TrippBio公司David E. Martin均参与了本研究工作及论文撰写。本文得到佐治亚研究联盟（Georgia Research Alliance）、TrippBio公司研发基金的支持。