近日,广东省农业科学院作物研究所特色作物与南药研究团队成功建立道地南药广藿香遗传转化与基因编辑体系,并通过靶向敲除PatPDS基因产生白化植物验证其有效性。相关成果发表于《园艺研究》(Horticulture Research)。
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广藿香的再生体系和遗传转化体系。受访者供图
广藿香为唇形科芳香植物,是道地大宗中药材,也是广东省第一批立法保护的南药品种,广泛用于医药和香料产业。广藿香在我国华南地区广泛种植、但鲜见开花结实,难于杂交,其四倍体杂交种和不成熟的遗传转化体系成为广藿香分子生物学研究和遗传改良的瓶颈,分子育种在广藿香改良上尤为重要。
研究人员通过优化激素组合,建立了以广藿香叶片、茎段、嫩芽等作为外植体,适合广藿香愈伤组织诱导和分化的方法。在此基础上,研究团队以PatPDS为靶基因,构建了CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过农杆菌介导转化广藿香胚性愈伤组织,经筛选验证获得阳性转基因植株。
为了验证 CRISPR/Cas9 系统对广藿香中PatPDS等位基因进行靶向编辑的效率,使用靶位点侧翼引物对受体材料和48株转基因植物进行高通量测序,并开发PolyDetecter基于 SNP 多态性进行基因分型,检测等位基因之间的编辑类型。
相关论文信息:https://doi.org/10.1093/hr/uhae021
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